XV. MÄ°LLÄ° TÃœRK ORTOPEDÄ° VE TRAVMATOLOJÄ° KONGRE KÄ°TABI

ABSTRAKTLAR, BÖLÜM 14: ARAÅžTIRMALAR

<< | Ýçindekiler | >>

KEMÄ°K GREFTLERÄ°NÄ°N REVASKÃœLARÄ°ZASYONU

Bu çalışmada, 15 albino tavşan üzerinde taze otojen, dondurulmuş allojen ve otoklavize otojen spongioz kemik greftlerinin revaskülarizasyonu, iris fluoresein anjiografisi (İFA7 ve histolojik yöntemlerle araştırıldı. Otojen kemik greftleri tavşan tibia metafizinden alındıktan hemen sonra, dondurulmuş allojen greftler -70°C de 3 haftalık saklamayı takiben oda ısısından çözündürüldükten sonra, otoklavize otojenler ise her tavşanın tibia metafizinden alınıp 120°C de 20 dakika otoklavize edildikten sonra tavşan gözlerinin ön kamarasına büyük iris arter halkasının üzerine yerleştirildi. Vaskülarizasyon İFA ile kontrol edildi. Otojen greftlerin; 6.2 0.4 günde vaskülarize olmaya başladığı, 9.4 0.9 günde vaskülarizasyonunu tamamladığı, dondurulmuş allogen greftlerin; 47.8 4.0 günde vaskülarize olmaya başladığı ancak 96 günlük izlenmede vaskülarizasyonun tamamlanmadığı saptandı. Otojen otoklavize greftlerde ise 167 günlük izlemde vaskülarizasyona ait bulgu gözlenmedi. Sonuç olarak, spongioz otojen greftlerin süratle revaskülarize olduğu, dondurulmuş allojen greftlerin yavaş olmakla beraber revaskülarize olabildikleri, otoklavizasyondan sonra ise kemiklerde revaskülarizasyonun olmadığı gözlendi.

GiriÅŸ

20. yüzyılda top alanında en önemli gelişmelerden birisi de organ transplantasyonudur. Kemik kandan sonra insan vücudunda en fazla transplante edilen dokudur(1). Kemik greftleri, infeksiyon, travma, tümör nedeniyle hasara uğrayan yada zayıflayan iskelet sisteminin kemik defektelirinin ortadan kaldırılması amacıyla kullanılmaktadır(2,3).

Otojen greftin şekil, büyüklük, miktar bakımından sınırlı olması, grefti almak için fazladan kesiye ve zamana ihtiyaç duyulması, greft alınan yerde hematom, kırılma, heteropik kalsifikasyon gibi komplikasyonların oluşma riski, ameliyat edilen bireyden osteokondral greft alınmaması, hekimleri allogreft kullanmaya yönlendirmiştir(4,5).

Günümüzde tümör cerrahisinde ulaşılan yen bilgi ve deneyimler sonucu amputasyon ve radikal rezeksiyon endikasyonları azalmış, lokal geniş rezeksiyonlar tercih edilmeye başlamıştır. Bu durum ciddi rekonstüriktif girişimlere ihtiyaç doğurmuş, pahalı ve zor bir yöntem olan kemik bankacılığını gündeme getirmiştir. Ancak istenilen boyutlarda kemik sağlama zorluğu, olasi immunolojik sorunlar ve kemik bankacılığı gibi pahalı bir yöntemi para ayıramayan sosyo-ekonomik durumu düşük ülkelerde rekonstüriksiyon sorunu tümörlü bölümün eksize edilip otoklavizasyonundan sonra replante edilmesiyle aşılmayan çalışılmıştır(6,7,8, 9,10).

Bu çalışmada amacımız, taze otojen, dondurularak saklanan allojen ve otoklavize edilmiş otojen greftlerin revaskülarizasyonu ve kemik indüksiyonunu gözlemlemek ve karşılaştırmaktır. Bu amaçla kemik greftleri albino tavşanların gözlerinin ön kamarasına yerleştirilmiştir. Deneysel çalışmalarda göz, deneğe zarar vermeksizin rahatlıkla direk klinik izlem yapılabilecek, anjioblastik cevap verme yeteneğine sahip bir organdır(1).

Materyal ve Metod

Araştırma T.Ü.T.F. araştırma laboratuarında 1 yaşında, sağlıklı, ortalama ağırlığı 2,5 kg olan 15 adet albino tavşan üzerinde gerçekleştirildi. Denekler ameliyat öncesi iki hafta süreyle gözlem altında tutuldular. Beşer elemanlı üç gruba ayrıldılar. Ameliyat öncesi tüm denekler 6 saat süre ile aç bırakıldı. Tüm deneklerin göz ameliyatları Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalından bir öğretim üyesi tarafından yapıldı. Tavşanların anestezisine ketamin hidroklorid (Ketalar, Parke-Davis) 10 mg/kg İ.M'ile başlandı ve Xylazin Hidroklorid (Rompun, Bayer) 10 mg/kg İ.M yapılarak idame sağlandı. Tüm ameliyatlar ortalama I 20 daikada sonlandı.

1. Grup: deneklerin tibiasına saha temizliğini takiben anteromedial kesiyle ulaşıldı. Periost sıyrıldı, metafizer bölgeden 2x2x1 mm boyutlarında spongioz greft alındı. Cilt kapatıldı.

2. Grup: Çalışma dışı bir tavşandan alınan tibia steril koşullarda yumuşak dokularından ayrıldıktan sonra -70 °C'de 3 hafta süreyle saklandı. Ameliyattan 1 saat önce oda koşullarında serum fizyolojik içersinde çözdürüldü. Tibia metafizindeki spongioz kemiklerden 2x2x1 mm boyutlarında greftler hazırlandı.

3. Grup: Çalışma grubundaki tüm tavşanların tibia metafizinden steril koşullarda 2x2x1 mm boyutlarında spongioz greft alındı ve cilt kapatıldı. Alınan greftler aynı vericiye implante edilmek üzere numaralandırıldılar. Greftler 120 °C'de 20 dakika süreyle otoklavize edildiler.

Tüm greftlerin serum fizyolojikle yıkanmasını takiben, korneaya saat 12 hizasından mikrokop altında kornea korneal kesiyle girildi, önkamara viskoelastik madde Metil selüloz %2 (Adatocel, Adatomed GmbH) ile oluşturuldu. Greft kesi yerinden 3-4 mm temporale, büyük iris arter halkası üzerine gelecek şekilde yerleştirildi. Ön kamaradaki viskoelastik madde aspire edildi. Kornea 10/0 prolenle tek kelebek sütür atılarak kapatıldı.

Tüm deneklerde ameliyat sonrası ilk 3 günlük süre boyunca ameliyat edilen gözlerine topikal olara Tobramisin sülfat gtt (Tobrex, Alcon) ve Deksametazon gtt (Maxidex, Alcon) 3x1 gtt/gün kullanıldı. Sistemik antibioterapi uygulanmadı. Otojen greft implante edilen deneklere 3'er gün dondurulmuş ve otoklavize edilmiş greft implante edilmiş deneklere Tşer gün, aralıklarla kulak venleri aracılığıylı icc'lik Fluoresceine %20 Faure (Labrotieres H. Faure) opak madde verilerek iris fluoresein anjiografisi (İ.F.A) (Canon CF 60 UV Fundus Camera) çekilerek fotograflandı ve biomikroskobik muayene yapıldı. Araştırma sonunda tüm denekler sakrifiye edilerek anükleasyon yapıldı ve histolojik olarak incelendi.

Sonuç

Ameliyat sonrası yapılan biomikroskobik muayenlerde bir deneğe kortikospongioz greft implante edildiği gözlenerek çalışma dışı bırakıldı. Ameliyat sonrası dönemde deneklerde greft alınan bölgede ve gözde enfeksiyon görülmedi. Ameliyat ettiğimiz tüm denekler izlem sürelerini sağlıklı olarak tamamladırlar.

1. grup tavşanların hepsinde 3. günde yapılan biomikroskobide greft üzerinde hemoraji, ön kamarada enflamasyon mevcuttu. IFA de greft çevresinde minimal opak madde birikimi vardı. 4 denekte 6. gün revaskülarizasyon başladı ve 9. günde tamamlandı. 1 denekte 7. gün revaskülarizasyon başladı ve 11. günde tamamlahdı. Ortalama revaskülarizasyon başlangıç günü 6.2±0.9 gün olarak bulunmuştur. Histolojik incelemede tüm 1. grup deneklerde greft içerisinde kemik iliği, damarlanma ve yeni kemik oluşumu gözlenmiştir.

2. grup tavşanlardan 4 tanesinde 46. günde çekilen İFA de greft revaskülarizasyona ait olduğu düşünülen damarlanma gözlendi. Bir greftte damarlanma 55. günde başladı 96. gün çekilen İFA de vaskülarizasyonun tamamlanmadığı gözlendi. Ortalama revaskülarizasyon başlama zamanı 47.8±4.0 olarak bulundu. Histolojik incelemede otojen greftlere oranla daha az damarlanma ve kemik iliği mevcuttu. Yeni kemik oluşumu vardı. 1 dondurulmuş grefte dejenere kemik mevcuttu.

Referanslar

1. Prolo DJ, Rodrrigo JJ. Contemporary bone graft physiology and surgery. Clin Orthop. 200:322-331, 1985.

2. Mankin HJ, Dopelt SH, Sullivan TR, et al. Osteoarticular and inftercalaray allograft Transplantation in the menagement of malignant tumor of bone. Cancer. 50:613-630, 1982.

3. Spence K, Bright R, Fitzgerald S, et al. Solitary unicameral bone cyst: Treatment vwith freeze-dried crushed cortical bone allogreft, A review of 144 cases. J Bone Joint Surg. 58A:636-641, 1976.

4. Aykurt M. Tıbbi prensipleri ve yasal ySnleri; Kemik bankası kurulması. Sendrom:9-14, 1991.

5. Burchard H. Biology of bone transplantation., Clin Orthop North Am. 2:187196, 1987.

6. Yablon IG, Cooperband S, Covall D. Matrix antigen in allografts (The humaral respones). Clin orthop. 168: 243-251, 1982.

7. Yablon IG, Cooperband S, Covall D. Matrix antigen in allografts (The cell mediated response). Clin orthop. 172:277-280, 1983.

8. Smith WS, Struhl S, Arbor A. Replantation of autoclaved autogeneus segment of bone for treatment of chondrosarkoma. J Bone Joint Surg. 70A:70-75, 1988.

9. Köhler P, Kreicbergs A. Chondrosarcoma terated by reimplantation of resected bone after autoclaving and supplemantation with allogeneic bone matrix. Clin orthop. 249:281-284, 1993.

10. Lauritzen C, Alberius P, Santenelli F, Valfors B, Lilija J. Stephensen H. Reposition of craniofacial tumonıs bone after autoclaving. Skand J Plast Reconst Hand Surg. 25:161165, 1991.

11. Daftari TK, Whitesides TE, Heller JG, et aL nicotine on the revascularization of bona graft. Spine 80904-911, 1994.